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賽默飛離子色譜柱選擇、清洗、存放的幾個(gè)要點(diǎn)

更新時(shí)間:2019-08-05      點(diǎn)擊次數(shù):4426
   賽默飛離子色譜柱是一種通過(guò)檢測(cè)液體中陰陽(yáng)離子的常量以及痕量的測(cè)量方式,在該過(guò)程中,利用抑制住抑制水質(zhì)中電解質(zhì)的背景導(dǎo)電率的目的,是液相色譜。賽默飛離子色譜的特點(diǎn)主要在于利用了樹脂材料,而其進(jìn)樣體積較小,對(duì)于淋出液能夠進(jìn)行在線自動(dòng)連接的電導(dǎo)檢測(cè)。一般采用酸、堿及鹽的水溶液作為流動(dòng)相,要求系統(tǒng)可以耐酸、耐堿,因此通常賽默飛離子色譜裝置采用非金屬材質(zhì)。
  一、賽默飛離子色譜柱的選擇
  1、樣品是極性的且弱酸性的就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測(cè),即要選擇承受100%純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱
  2、如果樣品極性太強(qiáng),或酸性太強(qiáng);可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng),對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn),另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái),基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn)。
  3、若樣品是堿性的可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾,一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做,因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留。
  4、如果堿性化合物的極性太強(qiáng),或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè),優(yōu)點(diǎn)是方法開發(fā)簡(jiǎn)單,缺點(diǎn)是目前實(shí)現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價(jià)格也高。或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱。缺點(diǎn)是不能用來(lái)分析其它樣品,對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)。也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱。
  二、賽默飛離子色譜柱的清洗
  1.對(duì)所做的樣品要有充分的了解
  用對(duì)該樣品洗脫能力zui強(qiáng)的流動(dòng)相清洗
  2、硅膠柱的一般方法
  先用甲醇法洗去極性雜質(zhì)
  用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
  3、鍵合相柱(烷基)的一般方法
  20倍柱體積德:甲醇-氯仿-甲醇-水依次沖洗
  柱子尺寸柱子體積沖洗體積
  150*4.6mm2.5ml50ml
  200*4.6mm3.3ml65ml
  250*4.6mm4.2ml80ml
  三、賽默飛離子色譜柱的存放
  1、存放前的處理(除去雜質(zhì)、鹽)
  2、合適的存放溶劑
  3、避免色譜柱床的干枯
  4、避免機(jī)械震動(dòng)
  5、防止細(xì)菌生長(zhǎng)
  6、注意存放的溫度

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